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    染色質免疫共沉淀(CHIP) 威斯騰生物—科研合作/成果轉化

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       染色質免疫共沉淀(CHIP) 威斯騰生物—科研合作/成果轉化,行業標桿!
       
      威斯騰生物——科研合作/成果轉化,行業標桿!
      原理
      真核生物的基因組DNA以染色質的形式存在。因此,研究蛋白質與DNA在染色質環境下的相互作用是闡明真核生物基因表達機制的基本途徑。染色質免疫沉淀技術(chromatin immunoprecipitation assay, CHIP)是目前唯一研究體內DNA與蛋白質相互作用的方法。
      CHIP基本原理是在活細胞狀態下固定蛋白質-DNA復合物,并將其隨機切斷為一定長度范圍內的染色質小片段,然后通過免疫學方法沉淀此復合體,特異性地富集目的蛋白結合的DNA片段,通過對目的片斷的純化與檢測,從而獲得蛋白質與DNA相互作用的信息。
      CHIP不僅可以檢測體內反式因子與DNA的動態作用,還可以用來研究組蛋白的各種共價修飾與基因表達的關系。而且,CHIP與其他方法的結合,擴大了其應用范圍:CHIP與基因芯片相結合建立的CHIP-on-chip方法已廣泛用于特定反式因子靶基因的高通量篩選;CHIP與體內足跡法相結合,用于尋找反式因子的體內結合位點;RNA-CHIP用于研究RNA在基因表達調控中的作用。由此可見,隨著CHIP的進一步完善,它必將會在基因表達調控研究中發揮越來越重要的作用。
       
      ChIP的一般流程
      甲醛處理細胞---收集細胞,超聲破碎---加入目的蛋白的抗體,與靶蛋白-DNA復合物相互結合---加入ProteinA,結合抗體-靶蛋白-DNA復合物,并沉淀---對沉淀下來的復合物進行清洗,除去一些非特異性結合---洗脫,得到富集的靶蛋白-DNA復合物---解交聯,純化富集的DNA-片斷---PCR分析。
       
      染色質免疫共沉淀/CHIP /整體實驗
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      【實驗預訂電話】023-65227525; 18423440835 
      【網址】www.cqwestern.com;  新版網址:www.cqwestern.net;
           Cas9網址: www.bg-cas9.com; SCI網址:www.westernsci.cn;
      【郵箱】huameixinan@163.com;china-western@163.com
      【傳真】023-65227525
       
       
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